详细信息

                             

 

具体信息如下

应用

FuGENE ^® HD转染试剂，是下一代的转染试剂，动物源性成分。它的设计包括昆虫细胞和许多细胞线未转由其他试剂（如。，MCF-7，HeLa细胞的RAW 264.7，PC-3，MA-10，肝癌，SH-SY5Y细胞转染的真核细胞中广泛A7r5，STO，SCC-61，STSAR-90，SQ20B，T98）。

 

 

好处

• 产生有意义的生理结果，由于FuGENE ^® HD转染试剂具有低毒性，并没有“触电”细胞（图1）。

 

图1： 使用两个标准介质条件下的转染试剂转染效率的比较之后，他们用一个质粒携带LacZ基因转染，细胞培养一个额外的24小时。设置从罗氏与β-半乳糖苷酶染色检测β-半乳糖苷酶的表达。

 

 

 

• 防止细胞的损失， 因为FuGENE ^® HD转染试剂的有效运作（图1）在标准细胞培养媒体和那些包含多达100％的血清（图2），消除了媒体变化的需要（转之前或之后）。

图2： 标准生长介质中存在较高的血药浓度有两个转染试剂转染效率的比较是由100％FBS转染前1小时更换。与质粒携带的LacZ基因转染细胞后，他们被培养为一个额外的72小时。设置   从罗氏与β-半乳糖苷酶染色检测β-半乳糖苷酶的表达。

• 提供一个很好的模型系统，为模仿生物的条件，因为FuGENE ^® HD转染试剂转染高（可达100％）血清中的细胞。

 

 

 

• 节省时间和减少错误，因为转染程序 FuGENE ^® HD转染试剂很少采取的步骤（图3），不需要定制不同类型的细胞。

图3： 转染过程 FuGENE ^® HD转染试剂  ，请注意该程序不需要媒体变化后第2步。

 

 

 

• 生成的蛋白质表达水平高，在众多的追随者和悬浮适应的真核细胞系，包括HEK-293（图4a），Hep G2细胞，CHO-S的CHO - K，COS-7，COS-1，和昆虫细胞株高五（图4b）和昆虫。 

 

图4a：高悬浮适应哺乳动物细胞的转染效率和蛋白的表达。
小组：的HEK-293 EBNA细胞悬浮适应与质粒DNA表达GFP转。转染试剂/ DNA比值为7:2，6:2，5:2，4:2，3:2。B组：转染细胞的比例确定转染后28小时，绿色荧光蛋白的数量估计在考马斯染色凝胶蛋白在转染后72小时。*估计产量

 

图4b： 高转染效率和高五昆虫细胞中蛋白表达的
小组：含有LacZ基因的载体转染细胞。转染效率转染后24小时组织化学染色表明，β-半乳糖苷酶的活性（β-gal 染色集）小组B：表达人类激酶Akt1与MKK6载体转染细胞。细胞裂解液中的蛋白表达，Western blot检测转染后72小时内。

 

 

 

 

• 简化下游蛋白质纯化，因为与FuGENE ^® HD转染试剂转染，往往会产生高表达的蛋白水平。
• 生产速度远远超过杆状病毒细胞表达系统在昆虫细胞中的蛋白质，  蛋白质生成与FuGENE ^® HD转染试剂启动的程序，可以采取比baclovirus系统（图5）少18天（从转染蛋白质纯化）。

   

图5： 比较传统的杆状病毒细胞表达方式，表达系统，使用FuGENE ^® HD转染试剂。

 

 

产品描述

成分： *和专有的混合在80％乙醇，许多组件。

存储：   稳定在+2°C至+8°C。

稳定性：  2年，从生产之日起开始。

 

内容

80％的乙醇溶液，过滤消毒（0.1微米）过滤器，在透明的玻璃小瓶包装。

 

质量

很多具体分析： 
每个FuGENE很多仔细的检查，使用ISO DIN 9001认证的程序，以确保产品按规范执行是*的从很多很多。

功能分析：
转染COS 7细胞的96孔板报告基因的载体DNA，0.3μLFuGENE ^® HD和0.1微克的DNA或0.25μLFuGENE ^® HD和0.1微克的DNA。通过对参考很多比色法测试报告基因活性的监测。活动必须≥75％相比，参考很多在测试上面列出的金额，至少之一。

细胞毒性分析：
使用细胞生长评估分析   这是一种间接测量的细胞毒性。其余细胞功能分析的可行性测试。