无机焦磷酸酶(酵母)纯化自重组E.coli菌株,携带有从酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)克隆的ppa基因和蟾分枝杆菌(Mycobacteriumxenopi)GyrA内含肽的融合基因。该焦磷酸酶催化无机焦磷酸盐水解生成正磷酸盐:P207–4+H20→2HP04–2。在核酸扩增实验中,其可解除生成的无机焦磷酸盐对反应体系的抑制。
应用
1.反转录反应中提高RNA产量
2.增强DNA复制
注意事项
(1)该酶在多种反应Buffer中均具有活性,通常该酶在HDA扩增、LAMP扩增等实验中,可直接接入即可。
(2)该酶的用量在不同的实验中需要优化,通常在0.05~1U/ml浓度调整。
(3)该酶的最佳反应温度为25°C,其在16~37°C均有活性,65°C10min可使该酶失活。