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柱式法提取组织 RNA 试剂盒

货号：R1240

规格：50T/100T

保存：室温（15℃-25℃）干燥保存，有效期 1 年。

注意：使用前请先在洗涤液和漂洗液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶体上的标签。

产品简介：该试剂盒对经典的异硫氰酸胍抽提 RNA 的方法进行了改良。改良后的裂解液能迅速裂解细胞，释放出 RNA 的同时灭活 RNase。RNA 在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜上，再通过一系列漂洗和离心等步骤进一步将蛋白等杂质去除，最后用 RNase-Free ddH2O 将 RNA 从硅基质膜上洗脱。本试剂盒操作快速便捷，安全无需使用酚、氯仿等有毒试剂，操作安全。

操作步骤：

1、细胞裂解取 25mg 左右组织，每管加入 600ul 裂解液，小钢珠破碎，冰浴放置 5min。

2、向吸附柱中加入混合液。4℃ 13000rpm 离心 3min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。

3、向吸附柱中加入 600ul 洗涤液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，4℃13000rpm 离心 2min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。

4、向吸附柱中加入 50ul Dnase 酶，静置 10~15min。

5、向吸附柱中加入 600ul 漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)。4℃13000rpm 离心 2min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。

6、重复操作步骤 5。

7、4℃ 13000rpm 离心 2min，将吸附柱敞口室温放置 3min，以除去多余的乙醇。

8、将吸附柱放到一个干净的离心管上，向吸附柱中加入 30-100μL 洗脱液，室温放置 2min，4℃，13000rpm 离心 1min，得到 RNA 溶液，RNA 保存于-80℃。

注意事项：

1、所有相关器皿耗材都应为 RNase-free 产品，操作过程要小心，带口罩、手套避免环境中 RNA 酶污染样品。

2、洗脱液的体积不应少于 30μL，体积过少会影响提取效率，RNA 产物应保存在-80℃，以防 RNA 降解。

3、RNA 浓度及纯度检测：提取的 RNA 片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260/OD280 比值应为 2.0-2.2。

备注：25mg 小鼠肝组织样品，用 50μL RNase-free ddH2O 洗脱。