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上海索莱宝生物科技有限公司
专业生化试剂供应商,专业分子生物学试剂生产商
Pfu DNA Polymerase
目录号 包装 价格
PC1300-500 500U 180.00
PC1300-1000 1000U 320.00
产品简介:本公司生产的Pfu DNA Ploymerase是从克隆有Pyrococcus
furiosis DNA Ploymerase基因的大肠杆菌中表达并经过柱纯化分离出
来的重组蛋白,其分子量为90kDa。由于Pfu酶具有3’→5’核酸外
切酶活性,它能纠正DNA扩增过程中产生的错配,而传统的Taq酶却
不能,其它耐热DNA Polymerase如Vent、Deep Vent、Tli、UITma等
虽具有校正功能,但Pfu酶是目前已发现的所有耐热DNA Polymerase
中出错率低的。Pfu酶无5’→3’核酸外切酶活性,PCR反应中的
延伸速度一般为0.5-1kb/分钟,比Taq酶要低。Pfu 酶比Taq酶热稳定
性更好,95℃ 1小时仍保持90%以上的活性,对于GC含量很高的模
板,变性温度可以提高到98℃而不影响其活性。Pfu酶的PCR产物为
平末端,可加A处理再与T-载体连接或使用平末端克隆载体。一般用
于DNA的高保真扩增,如基因表达克隆、基因定点突变、细胞内基
因点突变分析(SNP)和末端补平等。
活性定义:1单位(U) Pfu DNA Polymerase活力定义为在74℃,30
分钟内,以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,将10nmol
脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。
质量控制检测:SDS-PAGE检测纯度大于
99%;经检测无外源核酸酶活性;PCR方法检测无宿主残余DNA;
能有效地扩增人类基因组中的单拷贝基因;室温存放一周,无明显
活性改变。
产品内容:
酶储存缓冲液 10×Pfu Buffer
50 mM Tris-HCl (pH 8.2) 200 mM Tris-HCl (pH 8.8)
0.1 mM EDTA 100 mM KCl
1 mM DTT 100 mM (NH4)2SO4
50% glycerol 20 mM MgSO4
Stabilizers 1%Triton X-100
其它
注意事项:
1、Pfu DNA Ploymerase应储存于-20℃,有效期12个月。
2、取Pfu DNA Ploymerase做PCR反应时,请用高压灭菌处理过的
吸头。
3、用Pfu酶扩增时,引物的纯度要求较高,引物长度大于18个碱
基,Tm值在55-80℃之间,引物浓度在0.1-0.5uM之间,比Taq
酶略高。
上海索莱宝公司 长期经营各种生化试剂。价格实惠,质量有保证。如需要相关产品可在线咨询。