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看完这些你就知道什么是Millipore PVDF膜了

点击次数:577    发布时间:2021-05-07

  Millipore PVDF膜即聚偏二氟乙烯膜(polyvinylidene fluoride)是蛋白质印迹法中常用的一种固相支持物。PVDF膜是疏水性的,膜孔径有大有小,随着膜孔径的不断减小,膜对低分子量的蛋白结合就越牢固。
 
  PVDF膜是一种聚偏二氟乙烯(Polyvinylidene Fluoride, PVDF)印迹膜。最常见用于免疫印迹(immunoblot, 即Western blot)时蛋白从胶到膜的转印,也可用于吸附分析、氨基酸分析、N端蛋白质测序、点和狭缝印迹检测(dot and slot blot)、糖蛋白显色和脂多糖分析等。
 
  本PVDF膜0.2μm适用于大多数的免疫印迹,特别适用于分子量小于20kDa的蛋白质,可以有效减少小分子量蛋白的渗漏。本产品比0.45μm PVDF膜具有更高的蛋白质吸附率和蛋白测序得率,例如对于胰岛素、BSA的吸附能力分别是常用的0.45μm PVDF膜的约1.64倍和1.58倍。
 
  与硝酸纤维素膜(Nitrocellulose membrane, NC膜)相比,PVDF膜具有多种优点。PVDF膜具有很高的机械强度,不易破裂或卷曲;具有背景低、溶剂相容性广,以及着色能力优异等优点;此外,PVDF膜经适当处理后还可以重复检测。
 
  PVDF本质是一种疏水性的聚合物,在水溶液中不会浸湿,为了在水性缓冲液和系统中使用PVDF膜,首先必须将其浸泡在50%(v/v)或更高浓度的醇溶液中。
 
  (PVDF膜在使用时需预处理,用甲醇处理的目的是活化膜上的正电基团,使其更容易与带负电的蛋白结合。)甲醇、乙醇和异丙醇都适合浸泡这种膜。随着膜的外观从不透明到半透明,完全浸湿是显而易见的。之后必须用水反复冲洗以去除醇类,经预处理的膜可以直接放入转印缓冲液中平衡。
 
  一旦膜被浸湿,蛋白结合可通过蛋白与膜的接触而实现。由于蛋白与膜的结合贯穿整个膜的厚度(深度),结合能力是由孔的内部表面积来决定的,随着膜孔径的不断减小,膜对低分子量的蛋白结合就越牢固。
 
  0.2um PVDF膜内部表面积大约是0.45um PVDF 膜的三倍,使其吸附能力更高。PVDF膜是疏水性的,一般大于20kD的蛋白就可以用0.45μm的膜,小于20kD的蛋白就要用0.2μm的膜。